PCR法支原體檢測試劑盒說明書

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產品詳情

產品描述

支原體污染會對細胞各個方面都造成不良影響，已經成為細胞培養中高度重視的問題，因此，定期進行支原體污染檢測是十分必要的。本支原體檢測試劑盒是采用PCR方法，特異性的檢測各種培養細胞生物材料（如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等）中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物是針對支原體16s rRNA序列的保守區域設計的特異性引物，可直接使用細胞培養液作為PCR模板，特異性擴增支原體DNA，搭配配套的Mycoplasma PCR Mix（2×）一小時內即可完成，本試劑盒檢測靈敏度高，可檢測低至20個拷貝的支原體。

產品組分

使用方法

使用方法

1. 樣品準備：取適量待檢細胞培養上清于潔凈的PCR管中，利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板。血清樣本可利用無支原體去離子水水稀釋后，取適量樣本于潔凈的PCR管中，利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板；

2. PCR體系配制：每次實驗需設置陰性對照（將1 μL待檢樣品換成等量的無支原體去離子水）與陽性對照（在1 μL待檢樣品中加入0.5 μL Positive Control后一起作為Template），實驗時戴一次性口罩與手套，謹慎操作，防止操作不當引入外源支原體污染；

3. PCR程序設置：

4. 凝膠電泳：取10 μL PCR產物，使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測；

5. 結果分析：每次實驗通過與陰性對照、陽性對照檢測結果比較確認樣品支原體污染情況，陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對照檢測結果中有條帶很有可能是PCR體系中出現污染，建議重新實驗確認結果。如有必要，也可對PCR產物進行常規測序，以確定具體的支原體種屬。

注意事項

1. 本試劑盒可以檢測M.orale，M.arginini，M.bovis，M.fermentans，M.gallisepticum，M.hominis，M.pirum，Ureaplasma spp，M.hyorhinis，M.pneumoniae，A.laidlawii等至少11種以上支原體污染。

2. 所有試劑在使用前于冰上充分解凍、混勻，使用完畢后于-20℃保存。

3. 每次實驗必須設置陰性對照、陽性對照，實驗組建議設置樣品模板梯度。

4. 操作時必須佩戴口罩，嚴格按照PCR操作標準，防止引入外源污染影響實驗結果。

5. 為了確保細胞實驗的可靠性及穩定性，建議定期進行支原體污染檢測。

6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

運輸及保存方法

冰袋（wet ice）運輸；-20℃保存，有效期12個月。

產品用途

    《PCR法支原體檢測試劑盒》（PCR Mycoplasma Detection Kit）可用于檢測一切可能含支原體的樣品，比如：（1）體外細胞培養的上清；（2）血清；（3）各種體液，如唾液、尿液、鼻腔分泌物等；（4）別的液體樣品。本產品僅供研究使用。