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abeomics 14-131ACL說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間：2022-09-21 點(diǎn)擊次數(shù)：1713

abeomics 14-131ACL說(shuō)明書(shū)

Abeomics Inc. 致力于通過(guò)將科學(xué)家從常規(guī)的動(dòng)手實(shí)驗(yàn)室工作中解放出來(lái)，幫助他們進(jìn)行更具創(chuàng)造性的研究。我們通過(guò)提供定制和合同實(shí)驗(yàn)室服務(wù)來(lái)做到這一點(diǎn)，這些服務(wù)可以縮短您獲得結(jié)果的時(shí)間，并讓您更快地專(zhuān)注于下一步。Abeomics 由一群經(jīng)驗(yàn)豐富的科學(xué)家組成，他們還創(chuàng)立了成功的企業(yè)，包括生命科學(xué)試劑和合同實(shí)驗(yàn)室服務(wù)提供商 IMGENEX Inc. 和 Protein Lounge，一個(gè)用于系統(tǒng)生物學(xué)和生物信息學(xué)。

TLR9/NF-kB Leeporter™ Luciferase Reporter-HEK293 Cell Line

TLR9/NF-kB Leeporter™ 螢光素酶報(bào)告基因-HEK293 細(xì)胞系

產(chǎn)品編號(hào)：14-131ACL

應(yīng)用：

功能分析

數(shù)量：	1 瓶
內(nèi)容：	每個(gè)小瓶在 1 ml 90% FBS + 10% DMSO 中含有 2 ~ 3 x 10^6 個(gè)細(xì)胞。
儲(chǔ)存情況：	收到后立即儲(chǔ)存在液氮中。

TLR9/NF-kB Leeporter™ 螢光素酶報(bào)告細(xì)胞系是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的 HEK 293 細(xì)胞系，在 NF-kB 反應(yīng)元件的轉(zhuǎn)錄控制下表達(dá)全長(zhǎng)人類(lèi) Toll 樣受體 9 (TLR9) 和海腎螢光素酶報(bào)告基因. TLR9 是關(guān)鍵的先天免疫受體之一。細(xì)胞系的功能活性已通過(guò) TLR9 配體測(cè)定得到驗(yàn)證，其中在被 CpG 激活后，TLR9 迅速啟動(dòng)下游信號(hào)通路并介導(dǎo) NF-kB 的核轉(zhuǎn)位（圖 1）。

應(yīng)用：

監(jiān)測(cè) TLR9 信號(hào)通路活性。
篩選 TLR9 信號(hào)通路的激活劑或抑制劑。

培養(yǎng)條件：

細(xì)胞應(yīng)在 37 o C 和 5% CO 2 使用 DMEM 培養(yǎng)基（含 L-谷氨酰胺、4.5g/L 葡萄糖和丙酮酸鈉）并添加 10% 熱滅活 FBS 和 1% Pen/Strep 以及 2 µ g/ml 嘌呤霉素和 5 µg /ml 殺稻瘟菌素（注意：在報(bào)告細(xì)胞分析期間可以省略嘌呤霉素和殺稻瘟素）。

建議在收到冷凍細(xì)胞后或在 37 o C 水浴中從液氮中快速解凍，轉(zhuǎn)移到含有 10 ml 不含嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的生長(zhǎng)培養(yǎng)基的試管中，離心細(xì)胞，重懸細(xì)胞在預(yù)熱的生長(zhǎng)中不含嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的培養(yǎng)基，將重懸的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到 T25 瓶中，在 37 o C-CO 2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

將 T25 燒瓶放在培養(yǎng)箱中 1~3 天，不要干擾或更換培養(yǎng)基，直到細(xì)胞*恢復(fù)活力并貼壁。一旦細(xì)胞貼壁率超過(guò) 90%，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基并通過(guò)胰蛋白酶消化和離心使細(xì)胞傳代。在第一次傳代時(shí)，切換到含有嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。細(xì)胞在達(dá)到*匯合之前應(yīng)該被分裂。

為了使細(xì)胞傳代，用胰蛋白酶/EDTA 將細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，加入完整的生長(zhǎng)培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到試管中，旋轉(zhuǎn)細(xì)胞，重懸細(xì)胞并將適當(dāng)?shù)确值募?xì)胞懸浮液接種到新的培養(yǎng)容器中。傳代比例 = 每周 1:10 至 1:20。為了獲得滿(mǎn)意的結(jié)果，細(xì)胞不應(yīng)傳代超過(guò) 16 次。

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